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  • 2019

    7-30

    剛復蘇的細胞狀態(tài)不好,有許多死細胞,頻繁換液好嗎?大致如題,有一些人認為細胞剛復蘇不能狗頻繁的換液,說是細胞會自己分泌細胞因子維持自己的生存,換液的話,就會影響細胞的生長,長的不好,但是我的細胞狀態(tài)不好而且有很多細胞碎片,細胞死亡之后在培養(yǎng)基中會不會釋放很多的有毒物質(zhì),對細胞的生長不利,所以就想要換液把死細胞和細胞碎片都洗掉,目前不知道怎么選擇,所以想請大家給一下就參考意見?能洗掉的就洗,洗不掉的也不用刻意的用力吹,正如你所說的細胞密度小,可能會損害細胞。換液的話還是2~3天...

  • 2019

    7-24

    基礎篇-無菌操作基本技術1.實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物...

  • 2019

    7-18

    近看到不少問有關細胞培養(yǎng)污染的事,正好我看到了一個有關這方面的總結,很全很好很強大,跟大家分享下細胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結如下:常見的污染如下:1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液...

  • 2019

    7-18

    生物刺激素肯定不是所謂的植物生長調(diào)節(jié)劑,植物生長調(diào)節(jié)劑也就是俗稱的激素,是指人們根據(jù)植物內(nèi)源激素的原理和功能進行人工合成的化學物質(zhì),當然不排除有個別企業(yè)也添加植物生長調(diào)節(jié)劑。而真正意義上的生物刺激素主要是天然物質(zhì)經(jīng)過提取或是分解得到的產(chǎn)物,對植物具有生理活性的物質(zhì),甚至有些可以直接刺激植物內(nèi)源激素的形成,主要的種類有腐植酸、氨基酸、微生物、甲殼素類、海藻提取物以及其他的一些植物提取物,其中應用廣泛的是氨基酸、腐植酸、海藻提取物這三類。很多壇友會奇怪,氨基酸、腐植酸、海藻提取物...

  • 2019

    7-16

    1、熒光免疫測定技術的概念:將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進行標記,試劑與標本中相應的抗體或抗原反應后,測定復合物中的熒光素,這種免疫技術,稱為免疫熒光素技術。2、熒光的產(chǎn)生:物質(zhì)吸收外界能量而進入激發(fā)狀態(tài),在回復基態(tài)時多余的能量以電磁輻射的形式釋放,即發(fā)光,這種光稱為熒光。這種物質(zhì),稱為熒光素。由光激發(fā)所引起的熒光,為光致熒光------熒光免疫技術由化學反應所引起的熒光,為化學熒光------化學發(fā)光技術3、熒光素的熒光特性:⑴停止供能,熒光現(xiàn)象隨即終止⑵對光的吸收和熒光的...

  • 2019

    7-16

    一般我們購買商品化的primaryantibody的時候,抗體的說明書中都會給我們一個推薦的抗體使用濃度。這個濃度在一定程度上來說,是過飽和的,可以滿足大多數(shù)實驗的染色需求。但是因為是過飽和的濃度,這就帶來了一定程度的抗體浪費。而過量的抗體,也會大大提高樣本的自發(fā)熒光。從另一個角度來看,因為廠家給出的推薦濃度都是基于一個特定的樣本濃度和樣本體積,所以在一些特殊的實驗中,比如樣本濃度或樣本體積過大的實驗,推薦的濃度就無法達到飽和滴加的要求。在這樣的前提下,推薦實驗用戶針對自己的...

  • 2019

    7-10

    1.實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取...

  • 2019

    7-5

    MEM細胞培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)是實驗室里常見和基本的實驗了,但卻不是簡單的。別小看細胞培養(yǎng),這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態(tài)不好,轉(zhuǎn)染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養(yǎng)的因素很多,讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應用廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)...

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